蛋白層析系統(tǒng)在操作過程中可能會遇到一些常見問題，以下是這些問題及其相應(yīng)的解決方案：
目的蛋白難洗脫
可能原因：洗脫條件太溫和。
解決方案：提高咪唑的濃度，嘗試低pH洗脫，或加入NaCl增加鹽離子濃度。
蛋白在柱上沉淀
可能原因：樣品中存在導(dǎo)致沉淀的雜質(zhì)或條件不當(dāng)。
解決方案：使用非離子去污劑，并注意控制緩沖液中的成分，如Mg2+等可能具有穩(wěn)定作用的輔因子。
目的蛋白純度不夠
可能原因：洗脫條件不夠優(yōu)化，存在雜蛋白共洗脫。
解決方案：優(yōu)化結(jié)合/洗脫條件，重復(fù)洗脫步驟，或降低洗脫流速，使用雙標(biāo)簽純化等方法提高純度。
柱層析柱堵塞
可能原因：樣品未過濾或緩沖液中有雜質(zhì)。
解決方案：定期對柱層析柱和相關(guān)管道進行清洗，確保樣品和緩沖液經(jīng)過適當(dāng)過濾。
系統(tǒng)壓力不穩(wěn)定
可能原因：系統(tǒng)內(nèi)有氣泡或管道連接處漏液。
解決方案：檢查系統(tǒng)并排除氣泡，重新連接漏液的管線。
以上解決方案僅供參考，遇到問題時需要根據(jù)具體情況進行分析和處理。